Transcervical Embryo Transfer in Mice

研究背景

小鼠是发育生物学和生殖生物学领域重要的模型动物，其胚胎移植技术是研究体外受精、嵌合体、转基因、基因打靶、胚胎冷冻种子库以及品系净化的关键环节。小鼠胚胎移植技术包括手术法和非手术法，但手术法不仅费时、技术要求高、增加小鼠疼痛，且术后易感染，而非手术法简单易行，节约时间，对小鼠损伤小，不易感染，减少小鼠的痛苦，同时也符合实验动物福利伦理原则。早在1951年，Beatty等人首先报道小鼠的非手术法胚胎移植，随后Marsk、王培生等人也都相继研究改进了非手术法胚胎移植，但成功率始终较低，这严重限制了该项技术的推广与应用。本文采用全新的小鼠非手术胚胎移植器，将小鼠桑椹胚或囊胚经子宫颈移植单侧子宫角，显著提高移植成功率。

材料与试剂

1. 小鼠饲养笼
2. 婴儿棉签
3. 眼科剪刀
4. 磁条
5. 小鼠非手术胚胎移植器（TCET）（保定正木生物科技有限公司）（图1）
   
   
   图 1. 小鼠非手术胚胎移植器（TCET）
   
   
6. 开膣管（保定正木生物科技有限公司）
7. 吸胚管（保定正木生物科技有限公司）
   
   
   图 2. 吸胚管
   
   
8. 一次性90 mm细菌培养皿（青岛金典生化器材有限公司）
9. 一次性1 mL注射器（江西洪达医疗器械集团有限公司）
10. CD-1成年雌鼠（北京维通利华实验动物技术有限公司）
11. CD-1结扎公鼠（北京维通利华实验动物技术有限公司）
12.  桑椹胚或囊胚
13. DPBS磷酸盐缓冲液（见溶液配方）
14. 阿佛丁（见溶液配方）
    

仪器设备

1. 体视显微镜（Nikon SMZ 745）
2. 恒温热台（北京比威克生物技术有限责任公司）
3. 纤维冷光源（南京博城光电科技有限公司 LED-100）
   

实验步骤