摘要:【原理】通过人工模拟体内环境(包括营养、温度、pH等)分别使初级卵母细胞在体外培养成熟和精子获能,并在专用的受精溶液中共培养完成受精过程。但是由于鸡生殖生理的特殊性,其体外受精的研究相对比哺乳动物难度较大。【目的和方法】本研究旨在利用体外受精方法生产鸡及进行鸡胚胎移植研究,以期通过此路径实现转基因鸡的生产。【结果】试验结果显示:母鸡产蛋后的30~40 min内有卵子排至卵巢囊内,此时为收集卵子的最佳时期。在44只体外受精的受体母鸡中,有28只产蛋,产蛋率为63.63%(软壳蛋7枚)。其中产出受精蛋8枚,受精率28.57%。孵化后有7枚发育,发育率25.00%。有3枚出雏,出雏率为10.71%。尽管孵化率低,但是在8枚受精卵中有3枚孵出小鸡。【结论】以上试验结果说明鸡卵母细胞可进行体外受精过程,为鸡的胚胎操作提供了参考依据。
材料与试剂
- 试验鸡
来自江苏省家禽研究所试验场10~12月龄产蛋高峰期的SR96黄羽母鸡和狼山黑羽母鸡。 - 硫贲妥钠麻醉(上海新亚药业有限公司,批号:9902102)
- 青霉素(Sigma, catalog number: P3032)
- 链霉素(Sigma, catalog number: P4333)
- 冰醋酸
- 醋酸钠
- NaHCO3
- 磷酸氢二钾
- 葡萄糖
- 蔗糖
- NaCl
- KCl
- CaCl2
- NaHCO3
- C-2精子稀释液成份(见溶液配方)
- 改良的 Ringer’s液配方(见溶液配方)
仪器设备
- 孵化箱(无锡设备厂,型号:鸣凤4820型)
- 培养箱(南京实验仪器厂,型号:HG303-4K型)
实验步骤
Copyright: © 2022 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
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