Isolation, Culture and Identification of Chicken Embryonic Stem Cells

材料与试剂

1. 离心管
2. 玻璃吸管
3. 新鲜受精蛋（扬州翔龙禽业发展有限公司）
4. Knockout DMEM (Gibco, catalog number: 10829018)
5. 胎牛血清（Gibco, catalog number: 10099141）
6. β-巯基乙醇（Sigma, catalog number: M3148）
7. 丙酮酸钠（Gibco, catalog number: 11360-070）
8. L-谷氨酰胺（sigma, catalog number: 59202C）
9. 非必需氨基酸（Sigma, catalog number: M7145）
10. mLIF（Millipore, catalog number: ESG1106）
11. bFGF（Sigma, catalog number: F0291）
12. hSCF（Sigma, catalog number: S7901）
13. 鸡血清（Gbico, catalog number: 16110-082）
14. 青链霉素（Solarbio, catalog number: P1400-100）
15. 碱性磷酸酶染色试剂盒（索莱宝，货号：G1480）
16. SSEA-1（Biolegend, San Diego, CA; dilution ratio 1:100）
17. 4%多聚甲醛（Solarbio, catalog number: P1110）
18. Triton X-100（索莱宝，货号：T8200）
    
19. Tween-20（索莱宝，货号：T8220）
20. 新洁尔灭
21. ESCs因子培养基（见溶液配方）[1,2]
22. 1% Triton（见溶液配方）
23. 封闭液（见溶液配方）
24. PBS-T（见溶液配方）
    

仪器设备

1. 镊子
2. 药匙
   
3. 培养皿
4. 325目钢筛
5. 微量移液器
6. 台式低速自动平衡离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司，TDZ4-WS）
7. 荧光倒置显微镜（OLYMPUS，IX51）
8. 超净工作台
   

实验步骤