材料与试剂

1. 10CM培养皿
2. 6CM培养皿
3. 国产玻璃针
4. 毛细管电极（Sutter Instrument公司，产品目录号：B100-75-10）
5. 手持式移卵针
6. Mineral oil (Sigma公司，产品目录号：M8410)
7. EmbryoMax® Ultra Pure Water, sterile H₂O(Millipore公司，产品目录号：TMS-006-A)
8. NaCl (Sigma公司，产品目录号：S5886)
9. KCl (Sigma公司，产品目录号：P5405)
10. MgSO₄·7H₂O (Sigma公司，产品目录号：M1880)
11. EDTA-Na₂ (Sigma公司，产品目录号：E6635)
12. DL-lactate solution (Sigma公司，产品目录号：L7900)
13. D-(+)-Glucose (Sigma公司，产品目录号：G6152)
14. KH₂PO₄ (Sigma公司，产品目录号：P5655)
15. Poly(vinyl alcohol) (Sigma公司，产品目录号：P8136)
16. Hepes·2Na (Sigma公司，产品目录号：H0763)
17. NaHCO₃ (Sigma公司，产品目录号：S5761)
18. Sodium pyruvate (Sigma公司，产品目录号：P4562)
19. Glutamine (Merck Millipore公司，产品目录号：TMS-002-C)
20. Hyaluronidase简称Hy ( Sigma公司，产品目录号：H3884)
21. Cytochalasin B简称CB (Sigma公司，产品目录号：C6762)
22. Polyvinylpyrrolidone 简称PVP（Sigma公司，产品目录号：PVP360)
23. Phenol red (Sigma公司，产品目录号：P0290)
24. BSA (Sigma公司，产品目录号：A3311)
25. KSOM medium (Merck Millipore公司，产品目录号：MR-106-D)
26. Pregnant mare serum gonadotropin简称PMSG (宁波三生药业)
27. Chorionic Gonadotropin for injection简称HCG (宁波三生药业)
28. 氯化钠注射液(山东华鲁制药有限公司)
29. CZB Stock(1L)（见溶液配方）
30. H-CZB Stock（见溶液配方）
31. Hepes-CZB（见溶液配方）
32. CZB（见溶液配方）
33. CaCl₂·2H₂O(100×stock)（见溶液配方）
34. 2%透明质酸酶溶液(HY)（见溶液配方）
35. CB-HCZB（见溶液配方）
    

仪器设备

1. 拉针仪（SUTTER INSTRUMENT公司，型号：P-97）
2. 煅针仪（NARISHIGE公司，型号：MF-900）
3. 体式显微镜（NIKON公司，型号：SMZ800N）
4. 倒置显微镜（OLYMPUS公司，型号：IX73）
5. 显微操作系统（品牌：NARISHIGE，型号：IM-9C）
6. 压电式破膜仪PIEZO（EPPENDORF公司，型号：PiezoXpert）
7. 热台（品牌：TOKRI HIT，型号：TPX-SQFT）
8. 离心机（EPPENDORF公司，型号：5430）
9. 超洁净工作台（品牌：万里，型号：SW-CJ-2FX）
10. 二氧化碳恒温培养箱（THERMO公司，型号：i160）
11. 安全柜（THERMO公司，型号：1300 SERIES A2）
12. 倒置相差显微镜配备4X、10X、20X镜头（完整装置见图A）
    
    
    图A. 显微注射系统
    
    
13. 倒置相差显微镜热台
14. 超声清洗机
    

实验步骤