材料与试剂
材料
- 培养皿35mm×10mm(Corning,货号:430588)
- 胚胎移植口吸管(北京吉田生物科技有限公司,规格:1.0×500mm)
- 吸头(Axygen,货号:T-300-R-S、T-1000-B-R-S、T-200-Y-R-S)
- 无菌注射器(上海米沙瓦医科工业有限公司,规格:1mL)
- 50mL离心管(BD,货号:352070)
- 滤纸(宝威德,规格:60 × 60 cm)
动物:3-6月龄成年雄鼠,1-2只/品系。4-5周龄雌性供体小鼠,4-5只/品系(根据雄性小鼠背景品系选用)。本实验室所用动物来自杭州师范大学实验动物中心(生产许可证号:SCXK(浙)2016-0004,使用许可证号:SYXK(浙)2016-0014),饲养在独立换气笼盒系统,动物自由饮水、自由采食经Co60辐射的灭菌饲料。
试剂
- 注射用血促性素(PMSG, Pregnant Mare Serum Gonadotropin)(宁波市三生药业有限公司, 规格:1000IU×10瓶)和注射用绒促性素(hCG, human Chorionic Gonadotropin,)(宁波市三生药业有限公司, 规格:1000IU×10支)
- 矿物油(Sigma,货号:M8410)
- mHTF:按表1配制。
- mHTF-GSH:按表2配制。
- TYH with MβCD(TYH with Methyl-β-cyclodextrin)按表3配制。
仪器设备
- 100mL烧杯(蜀牛,货号:GG-17)
- 100mL容量瓶(天玻,货号:TB9)
- 生物安全柜(Thermo Scientific,型号:1384 )
- 超净工作台(苏净安泰,型号:HS-840-U)
- CO2培养箱(Thermo Scientific,型号:3111 )
- 体视显微镜(Nikon,型号: SMZ745T)
- 电子天平(Sartorius,型号:MSA125P-CE)
- 电热恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限公司,型号:DK-S22型)
- 微量移液器 (eppendorf,货号:3120000224、3120000240)
- 手术剪(上海金钟,型号:J21010)
- 医用镊(上海金钟,型号:J40120)
- 维纳斯剪(上海金钟,型号:YC0040)
- 显微镊(上海金钟,型号:WA3030)
- 眼科直剪(上海金钟,型号:Y00030)
- 眼科直镊(上海金钟,型号:JD1050)
实验步骤
引用格式:杨伟伟, 顾美儿, 桂飞, 宋晓明, 孙筱品, 唐蔚, 吴宝金. (2022). 小鼠体外受精. // 实验动物胚胎操作实验手册.
Bio-101: e1010947. DOI:
10.21769/BioProtoc.1010947.
下载引用格式
How to cite: Yang, W. W., Gu, M. E., Gui, F., Song, X. M., Sun, X. P., Tang, W. and Wu, B. J. (2022). In Vitro Fertilization of Mouse. // Embryo Manipulation Manual of Laboratory Animals.
Bio-101: e1010947. DOI:
10.21769/BioProtoc.1010947.
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