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小鼠胚胎冻存与复苏
Cryopreservation and Resuscitation of Mouse Embryos
发表时间: 2022年09月20日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010946 浏览次数: 2088
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摘要: 对体内或体外受精所得到的可供移植用的小鼠2-细胞期胚胎，通过特殊的低温保护剂和降温程序,尽可能减少冰晶形成造成的细胞结构损伤，使其在-196 ℃液氮环境下停止代谢并长期保存,在升温后能恢复活性。这是基因修饰动物常用的品系保存手段之一。
材料与试剂
材料
- 无菌注射器 （KDL 1ml）
- 100*20mm 培养皿 （FALCON 353003）
- 1ML冻存管 (Thermo Nunc CAT NO.377224)
- 短型玻璃巴斯德吸管(CorningCLS7095B5X-1000EA)
实验动物：需要保种的基因修饰小鼠模型。
试剂
- PMSG (宁波三生)
- HCG (宁波三生)
- FHM (Millipore, MR-025-D)
- DPBS (Millipore, MR-006-C)
- DMSO (Sigma, D2650)
- 食用盐
- M2 media（millipore, MR-015-D）
- KSOM AA media（millipore, MR-121-D）
- DMSO溶液（见溶液配方）
仪器设备
- 尖嘴系线镊 （协和医疗, MR-F201A）
- 手术剪 （金钟, JA2405）
- 200UL移液枪
- 程序降温仪(planner, Kryo360-1.7)
实验步骤
Copyright: © 2022 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：唐蔚, 俞骞, 李周结, 陈子尘, 王倩雯, 陈国元, 吴宝金. (2022). 小鼠胚胎冻存与复苏. // 实验动物胚胎操作实验手册. Bio-101: e1010946. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010946.
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How to cite: Tang, W., Yu, Q., Li, Z. J., Chen, Z. C., Wang, Q. W., Chen, G. Y. and Wu, B. J. (2022). Cryopreservation and Resuscitation of Mouse Embryos. // Embryo Manipulation Manual of Laboratory Animals. Bio-101: e1010946. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010946.
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