材料与试剂
材料
- 培养皿35 mm×10 mm(Corning,货号:430588)
- 0.25 mL麦管(IMV,货号:005565)
- 三角盒(Minitube,货号:16981/01361)
- 硅胶管、塑胶管、硅胶帽(Drummond,货号:D2-000-000)
- 针式过滤器(Millex-GP,货号:SLGP033RB)
- 吸头(Axygen,货号:T-300-R-S、T-1000-B-R-S、T-200-Y-R-S)
- 50 mL离心管(BD,货号:352070)
- 1.5 mL离心管(上海生物工程,货号:F601620-0010)
- 无菌注射器(上海米沙瓦医科工业有限公司,规格:50 mL、20 mL、1 mL)
- 100 mL烧杯(蜀牛,货号:GG-17)
- 100 mL容量瓶(天玻,货号:TB9)
- 滤纸(宝威德 ,规格:60×60cm)
- 标签(自制)
- 记号笔(得力,货号:6881)
动物:3-6月龄健康雄性动物2-3只,需交配过,于冻精前一周取出雌鼠后单独饲养。所用动物来自杭州师范大学实验动物中心。生产许可证号:SCXK(浙)2016-0004,使用许可证号:SYXK(浙)2016-0014。饲养在独立换气笼盒系统,动物自由饮水、自由采食Co
60辐射的灭菌饲料。
主要试剂:
- CPA(表1)
- mHTF (modified human tubal fluid)(表2)
- 矿物油(Sigma,货号:M8410-1L)
- 液氮(杭州今工特种气体有限公司,规格:99.999%)
仪器设备
- 生物安全柜(ThermoScientific,型号:1384)
- 超净工作台(苏净安泰,型号:HS-840-U)
- 液氮罐(Thermo Scientific,型号:8210)
- 恒温加热台(深圳鑫诚,型号:JR-100)
- 体视显微镜(Nikon,型号:SMZ745T)
- 倒置显微镜(Nikon,型号:1500)
- 离心机(eppendorf,型号:5418)
- 电子天平(Sartorius, 型号:MSA125P-CE)
- 封口机(Fuji Impulse, 产品型号:P-200)
- 涡旋仪(IKA,型号:Vortex1)
- 微量移液器(eppendorf,货号:3120000224、3120000240)
- 手术剪(上海金钟,型号:J21010)
- 医用镊(上海金钟,型号:J40120)
- 维纳斯剪(上海金钟,型号:YC0040)
- 显微镊(上海金钟,型号:WA3030)
- 眼科直剪(上海金钟,型号:Y00030)
- 眼科直镊(上海金钟,型号:JD1050)
实验步骤
引用格式:顾美儿, 杨伟伟, 桂飞, 孙筱品, 宋晓明, 唐蔚, 吴宝金. (2022). 小鼠精子冻存与复苏. // 实验动物胚胎操作实验手册.
Bio-101: e1010944. DOI:
10.21769/BioProtoc.1010944.
下载引用格式
How to cite: Gu, M. E., Yang, W. W., Gui, F., Sun, X. P., Song, X. M., Tang, W. and Wu, B. J (2022). Cryopreservation and Resuscitation of Mouse Sperm. // Embryo Manipulation Manual of Laboratory Animals.
Bio-101: e1010944. DOI:
10.21769/BioProtoc.1010944.
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