Inducing Superovulation and Isolation of Mouse Oocytes

材料与试剂

材料

1. 培养皿 ：35 mm、60 mm、100 mm（Corning，货号：353001、353002、353003）
2. 胚胎移植口吸管（北京吉田生物科技有限公司，规格：1.0*500 mm）
3. 移液枪头（Axygen，货号：T-300-R-S、T-1000-B-R-S、T-200-Y-R-S）
4. 无菌注射器（上海米沙瓦医科工业有限公司，规格：1 mL）
5. 移液管（10 ml，corning 货号：CLS4488-200EA）
6. 离心管（1.5ml，Axygen 货号：MCT-150-C）

动物：提前一周从供应商订购供体雌鼠（动物周龄参考表1），并饲养在独立换气系统笼盒内，动物自由饮水、自由采食经Co⁶⁰辐射的灭菌饲料。

试剂

1. 生理盐水（0.9%氯化钠注射液）
2. 孕马血清促性腺激素PMSG、人绒毛膜促性腺激素（HCG） (生产商：宁波三生生物科技有限公司）
3. 75%消毒酒精
4. FHM胚胎操作液（EmbryoMax FHM HEPES Buffered Medium）（Milipore 货号：MR-025-D）
5. 透明质酸酶（HY）（SIGMA 货号：H3506）
6. KSOM胚胎操作液（KSOM Mouse Embryo Media）（Milipore 货号：MR-121-D）
7. PMSG（见溶液配方）
8. HCG（见溶液配方）

仪器设备

1. 烧杯（50 mL，蜀牛，货号：GG-17）
2. 移液枪（200 μl，eppenddorf）
3. 超净工作台（万里，型号：SW-CJ-2FX）
4. CO₂培养箱（THERMO，型号：i160）
5. 体视显微镜（Nikon，货号：SMZ800）
6. 手术剪（上海金钟，J21010）
7. 医用镊（上海金钟，J40120）
8. 眼科剪（上海金钟，Y00030）
9. 眼科直镊（上海金钟，JD1050）
   

实验步骤