材料与试剂

1. 1.5 mL离心管（Axygen, catalog number: MCT-150-C）
2. 10 μL一次性吸头（Axygen, catalog number: T300）
3. 200 μL一次性吸头（Axygen, catalog number: T200）
4. 35 mm一次性塑料平皿（海门, 货号: HC027）
5. 90 mm一次性塑料平皿（海门, 货号: HC030）
6. 3 mL塑料吸管（海泰, 货号: HC001）
7. 0.5 mL冻存管储存盒，内含开盖器（Thermo, catalog number: 3744WHI）
8. 鱼捞（上海海圣, 货号: HS018）
9. 海绵鱼托（自制，用于固定雄鱼位置）
10. 细轴吸水棉签（超市采购）
11. 吸水纸或厨房用纸（超市采购）
12. 泡沫盒
13. 长柄刮勺
14. 塑料勺子（边缘光滑）
15. 性成熟雌、雄斑马鱼
16. 75%医用消毒酒精（惠昌, 货号: BI10009259-2）
17. 8%次氯酸钠溶液（3A, catalog number: A04633）
18. Tricaine（Sigma, catalog number: E10521），4 °C短期储存，-20 °C长期储存
19. NaCl（Sigma-Aldrich, catalog number: 746398）
20. KCl（Sigma-Aldrich, catalog number: 746436）
21. Na₂HPO₄（Sigma-Aldrich, catalog number: RES20908）
22. KH₂PO₄（Sigma-Aldrich, catalog number: PHR1330）
23. CaCl₂（Sigma-Aldrich, catalog number: 793639）
24. MgSO₄（Sigma-Aldrich, catalog number: 63138）
25. NaHCO₃（Sigma-Aldrich, catalog number: 792519）
26. 胚胎养殖水（高温灭菌）
27. 去离子水（高温灭菌）
28. 液氮
29. 麻醉剂Tricaine储液（见溶液配方）
30. Hanks储存液（见溶液配方）
31. Hanks Premix溶液（见溶液配方）
32. Hanks溶液6（见溶液配方）
33. Hanks Buffer溶液（见溶液配方）
34. 胚胎消毒储存液（6%次氯酸钠）（见溶液配方）
35. 亚甲基蓝储存液（5 g/L）（见溶液配方）
    

仪器设备

1. 配种缸（上海海圣，型号：HS022）
2. 20 cm带齿镊子（Vetus, catalog number: MT-200）
3. 250 mL 烧杯（Bomex, catalog number: 20201-250）
4. 宽头镊子（Vetus, catalog number: 33A-SA）
5. 0.1-2.5 μL移液器（Eppendorf, catalog number: 3120000216）
6. 20-200 μL移液器（Eppendorf, catalog number: 3120000054）
7. 无菌过滤器接收瓶（Thermo, catalog number: 455-0150）
8. 解剖显微镜（Olympus, catalog number: SZ2-LGB）
9. 鹅颈灯（Olympus, catalog number: LG-PS2）
10. 恒温水浴锅（精宏，型号：DKB-501S）
11. 恒温培养箱（精宏，型号：HWS-080）
    

实验步骤