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高通量原位Ｘ射线衍射技术鉴定蛋白质晶体

High Throughput Identifying of Protein Crystals by In-situ X-ray Diffraction Technique

王 王乐乐
范 范仕龙

发表时间: 2021年12月10日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010881 浏览次数: 2253

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高通量筛选实验手册
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摘要：蛋白质结晶制备过程是需要大量的生长条件来进行筛选的，后续的研究步骤就是蛋白质晶体的观察和鉴定，而通过高通量自动化的设备可为繁复的晶体观察和鉴定提供快速简便的技术支持。本文利用原位蛋白质晶体衍射仪PX Scanner，介绍如何采用可见光表征方法高通量筛选出晶体，以及采用原位X射线衍射方法来实现蛋白质晶体的鉴定，而不需要将晶体捞出来，既不破坏其生长环境，又可以快速地检测出结果，其中用来观察的晶体板以筛选溶菌酶蛋白晶体的96孔晶体板为例。

Keywords: 原位X射线衍射 search 可见光表征 search 高通量筛选 search 蛋白质晶体鉴定 search

材料与试剂

  1. 96孔晶体板(Swissci, catalog number: 3W96TUVP)
  2. 溶菌酶(Macklin, catalog number: L6051-25g)
  3. Crystal Screen™试剂盒(Hampton Research, catalog number: HR2-110)
  4. Crystal Screen 2™试剂盒(Hampton Research, catalog number: HR2-112)

仪器设备

  1. 原位蛋白晶体衍射仪(Rigaku, 型号: PX Scanner)
  2. Mosquito蛋白结晶筛选仪(TTP Factory, 型号: Mosquito)
  3. 自动封膜机(BRANDEL, 型号: RS-232)

软件

  1. CrystalEyes

实验步骤

Copyright: © 2021 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：王乐乐, 范仕龙. (2021). 高通量原位Ｘ射线衍射技术鉴定蛋白质晶体. // 高通量筛选实验手册. Bio-101: e1010881. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010881.
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How to cite: Wang, L.L. and Fan, S.L. (2021). High Throughput Identifying of Protein Crystals by In-situ X-ray Diffraction Technique. // High-throughput Screening Protocol eBook. Bio-101: e1010881. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010881.
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