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神经干细胞诱导分化形成的神经元及神经网络的定量分析

The Quantitative Analysis of Neuronal Structure

孔 孔娟
王 王瑛

发表时间: 2021年12月07日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010876 浏览次数: 1635

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高内涵成像及分析实验手册
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摘要: 大脑由大量相互连接的神经元组成，大约1,000亿个神经元在我们的大脑中形成一个复杂且相互关联的神经网络，使我们能够生成复杂的思维模式和行动。神经元是神经系统的结构和功能的单位之一。神经元能感知环境的变化，再将信息传递给其他的神经元，并指令身体做出反应。神经退行性疾病最终导致的病理特征之一就是神经细胞渐进性死亡，神经网络破坏，从而引起记忆或运动能力丧失、行为异常、生活不能自理。针对神经元的胞体和突起识别，对其胞体大小，神经突起长度，节点数量及不同神经元突起之间的接触数量进行识别定量，是重要且客观的神经元结构的评价指标。

Keywords: 神经元 search 神经元结构 search 定量分析 search

材料与试剂

  1. Corning® 96-well Flat Clear Bottom Black Polystyrene TC-treated Microplates, Individually Wrapped, with Lid, Sterile (Corning, catalog number: 3603)
  2. Corning® 100 mm TC-treated Culture Dish (Corning, catalog number: 430167)
  3. Corning® Matrigel® hESC-Qualified Matrix (Corning, catalog number: 07181)
  4. STEMdiffTM Neural Progenitor Medium (STEMCELL, catalog number: 05833)
  5. AccutaseTM (Stemcell, catalog number: 07922)
  6. DPBS (BI, catalog number: 02-023-1 ACS)
  7. DAPI (Sigma, catalog number: D 9542)
  8. Anti-Tuj1 antibody (Sigma, catalog number: T 8660)
  9. Donkey anti-Mouse 488 (Invitrogen, catalog number: A-21202)
  10. 4% 多聚甲醛固定液 (BBI, catalog number: E 672002)
  11. STEMdiffTM Neural Progenitor Medium（Stemcell, catalog number:05833）
  12. Normal Donkey Serum (Jackson, catalog number:017-000-121)
  13. N2 Supplement-A (Stemcell, catalog number: 07152)
  14. NeuroCult™ SM1 Neuronal Supplement (Stemcell, catalog number: 05711)
  15. BrainPhy Neurobasal Medium (Stemcell, catalog number: 05790)
  16. Culture one (Gibco, catalog number: A3320201)
  17. Triton X-100 (BBI, catalog number: A600198)
  18. Hu Recom BDNF (Stemcell, catalog number:78005.1)
  19. Hu Recom GDNF (Stemcell, catalog number:78058.1)
  20. Hu Recom IGF-I (Stemcell, catalog number:78022.1)
  21. L-Ascorbic acid (Sigma，catalog number:A4403)
  22. cAMP（Sigma，catalog number: D-0260-5MG）
  23. 抗体稀释液（见溶液配方）
  24. 封闭缓冲液（见溶液配方）
  25. 神经分化培养基（见溶液配方）

仪器设备

  1. 细胞培养箱（Eppendorf, C 170i）
  2. 离心机（Eppendorf, 5810 R,）
  3. 全自动细胞计数仪（Countstar, Countstar FL）
  4. 高通量活细胞分析仪（Thermo Fisher Cellomics, VTI 700）

实验步骤

Copyright: © 2021 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：孔娟, 王瑛. (2021). 神经干细胞诱导分化形成的神经元及神经网络的定量分析. // 高内涵成像及分析实验手册. Bio-101: e1010876. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010876.
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How to cite: Kong, J. and Wang, Y. (2021). The Quantitative Analysis of Neuronal Structure. // High-Content Imaging and Analysis Protocol eBook. Bio-101: e1010876. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010876.
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