摘要: AlphaSreen (Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assay Screen) 技术是用于研究生物分子相互作用的一种实验方法，操作简便，灵敏度高，是一种“mix-and-read”的实验方法，尤其适用于高通量的自动化液体操作和检测体系。该实验系统主要含有两种微珠，一种是供体珠 (Donor Beads)，另一种是受体珠 (Acceptor Beads)。供体珠表面含有光敏感物质酞菁染料，当被680 nm激发光激发时，会催化周围的氧分子转化成激活形式的单态氧，当与受体珠接近时，单态氧会和受体珠表面的化学染料二甲基噻吩衍生物发生反应，产生520-620 nm的光信号。单态氧在水相溶液中非常不稳定，其半衰期大约是4 μs，作用距离在200 nm左右。供体珠和受体珠通过生物分子的结合被拉近到很近的距离 (~200 nm) 才能产生信号，而如果生物分子之间没有相互作用，供体珠和受体珠分散在溶液中，受体珠周围的单态氧浓度较低，则仅仅产生较低的背景值，这就意味着该体系中所有信号的产生势必为生物分子结合所导致。
AlphaScreen实验中的信号源自于Donor Beads和Acceptor Beads之间发生的放大级联反应产生的强信号，且其采用时间分辨模式进行读板，消除了大部分背景荧光，因而具有较低的背景。AlphaScreen 高信噪比的特性使其能够检测低至飞摩尔浓度的分子相互作用。同时，AlphaScreen技术具有广泛的应用性，酶活性、受体-配体相互作用、第二信使水平、功能性 GPCR 研究、DNA、RNA、蛋白质等分子之间的相互作用都可以使用 AlphaScreen 进行测量。

图文摘要