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利用高内涵检测线粒体活性氧实验

Mitochondrial ROS (Reactive Oxygen Species) Assay

李 李义
赵 赵宏伟
韩 韩帅
裴 裴钢

发表时间: 2021年11月12日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010862 浏览次数: 3345

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高内涵成像及分析实验手册
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摘要：ROS (reactive oxygen species) 是生物有氧代谢过程中的副产物，在细胞内产生的活性氧90%来源于线粒体。在线粒体氧化磷酸化过程中，活性氧的产生主要发生在线粒体内膜的电子传递链上。ROS对生理功能的维持起着重要作用，但是当受到外界压力的情况下 (化合物处理，辐射，病理状态) 线粒体活性氧的水平会明显增加，从而引起各种线粒体功能损伤，造成线粒体稳态失衡，严重影响细胞的正常运作。本实验是在神经干细胞上，通过化合物鱼藤酮 (线粒体呼吸链抑制剂) 干预，造成线粒体功能的损伤，然后利用高内涵仪器检测线粒体中产生的活性氧 (MitoROS) 水平。

Keywords: ROS search 线粒体 search 活性氧 search 高内涵 search

材料与试剂

  1. 96 孔黑边底透板 (costar, catalog number: 3904)
  2. HBSS (Gibco, catalog number: 2185781)
  3. MitoSOX Red mitochondrial superoxide indicator (Invitrogen, catalog number: M36008) 
  4. Poly-D-lysine (Sigma, catalog number: 049M4056V)
  5. Laminin (Sigma, catalog number: SLBP0800V)
  6. Rotenone (Selleck, catalog number: S2348)
  7. Hoechst 33342 (Beyotime, catalog number: C1022)
  8. PBS (见溶液配方)

实验步骤

Copyright: © 2021 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：李义, 赵宏伟, 韩帅, 裴钢. (2021). 利用高内涵检测线粒体活性氧实验. // 高内涵成像及分析实验手册. Bio-101: e1010862. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010862.
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How to cite: Li, Y., Zhao, H. W., Han, S. and Pei, G. (2021). Mitochondrial ROS (Reactive Oxygen Species) Assay. // High-Content Imaging and Analysis Protocol eBook. Bio-101: e1010862. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010862.
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