研究背景

抑制Bcl-xl蛋白来释放细胞凋亡压力的方法是一种有吸引力的治疗癌症的策略。 在此之前的报道中，有关于Bcl-xl蛋白的药物设计。在2002年，Hamilton课题组就以荧光偏振实验结果为评价标准，来理性设计Bcl-xl蛋白的小分子抑制剂。数年来，对Bcl-2家族蛋白小分子抑制剂的开发一直是科研界的研究重点，而结合高通量筛选的技术手段，使发现更好更优的先导化合物成为可能。艾伯维公司相继研发了Bcl-2，Bcl-xl，Bcl-w的共抑制剂ABT-737，以及Bcl-2特异性抑制剂ABT-199，并在2016年ABT-199获得FDA批准治疗与17-p缺失相关的慢性淋巴细胞白血病(CLL)。这显示出了Bcl-2家族蛋白抑制剂开发的巨大潜力。目前关于Bcl-xl蛋白抑制剂设计的主要问题是缺少特异性靶向Bcl-xl的小分子化合物。所以，建立高通量的Bcl-xl小分子抑制剂筛选体系，有利于助力Bcl-xl特异性小分子抑制剂的发现和设计，并通过靶向Bcl-xl蛋白，来实现癌症治疗的突破。

材料与试剂

1. Bcl-xl 重组蛋白 (Proteintech, catalog number: Ag1232)
2. 5-FITC-(Acp)-GQVGRQLAIIGDDINR-NH2 荧光多肽 (苏州强耀生物订制)
3. 384孔黑聚苯乙烯微孔板 (Corning, catalog number: 4514)
4. PBS磷酸盐缓冲液 pH 7.4 (1x) (Gibco, catalog number: C10010500BT)
5. 1.5 ml棕色不透光离心管 (Axygen, catalog number: MCT-150-X)
   

仪器设备

1. 多功能酶标仪 (Perkin Elmer, model: EnVision)
2. 微量离心机 (Thermo Scientific, model: Legend Micro 17R)
   

实验步骤