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高内涵活细胞成像研究多糖对巨噬细胞形态的影响

High Content Live Imaging to Investigate Macrophage Differentiation

郭 郭浩翔
夏 夏亚男
喻 喻欢
祖 祖鹤
张 张乐帅

发表时间: 2021年07月26日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010836 浏览次数: 2173

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高内涵成像及分析实验手册
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摘要：本实验采用高内涵成像与分析系统观察了各类中药多糖，包括黄芪多糖 (Astragalus polysaccharide, APSII)、灵芝多糖 (Ganoderma lucidum polysaccharide, GLPII) 及麦冬多糖 (Ophiopogon polysaccharide, OGPII) 对Raw264.7细胞分化与成熟的影响。与对照组相比，ASPII和GLPII能够显著改变细胞形态，刺激细胞变大并且细胞表面形成树枝状突触；相比之下，OGPII对细胞形态的改变并没有明显的影响。根据高内涵成像获得的图片，结合Matlab编程获得每个细胞的周长与面积，以分析定量细胞的不规则度。

Keywords: 中药多糖 search 巨噬细胞 search 高内涵成像 search 细胞不规则度 search

材料与试剂

  1. 96孔板
  2. 小鼠巨噬细胞Raw 264.7细胞株 (中科院上海生化所)
  3. ASPII，GLPII，OGPII粗提物 (西安源森生物科技有限公司)
  4. 脂多糖 (Lipopolysaccharide, LPS) (Sigma, catalog number: SMB00610)
  5. DMEM高糖细胞培养基 (Gibco, catalog number: 11965092)
  6. 胎牛血清 (Gibco, catalog number: 16140071)
  7. 青霉素-链霉素溶液 (碧云天生物技术, catalog number: ST488)
  8. DMEM高糖培养基 （见溶液配方）

仪器设备

  1. 高内涵系统 (Molecular Devices, ImageXpress Micro XLS)
  2. 二氧化碳细胞培养箱 (FormaTM Series 2 CO2 Incubator, Thermal Scientific)

实验步骤

Copyright: © 2021 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：郭浩翔, 夏亚男, 喻欢, 祖鹤, 张乐帅. (2021). 高内涵活细胞成像研究多糖对巨噬细胞形态的影响. // 高内涵成像及分析实验手册. Bio-101: e1010836. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010836.
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How to cite: Guo, H. X., Xia, Y. N., Yu, H., Zu, H. and Zhang, L. S. (2021). High Content Live Imaging to Investigate Macrophage Differentiation. // High-Content Imaging and Analysis Protocol eBook. Bio-101: e1010836. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010836.
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