Improve Research Reproducibility A Bio-protocol resource

小鼠脑组织冰冻切片

Cryostat Sectioning of the Mouse Brain

王 王雅娜*
田 田雨*
何苗 何苗
龚 龚玲

*Contributed equally to this work 发表时间: 2021年06月07日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010819 浏览次数: 11819

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摘要：在对脑组织进行免疫染色或原位杂交等实验之前，需要对组织进行切片处理。冰冻切片是基础研究中的常用技术，它是在低温条件下将生物组织快速冰冻至一定硬度后进行恒温冰冻切片的一种实验方法。与石蜡切片相比，冰冻切片无需脱水、透明、浸蜡等复杂的前处理过程，使细胞免于抗原活性损伤，且操作简便快捷。相较于振动切片，冰冻切片具有切片厚度限度宽、适用范围广等优点。本文以小鼠脑组织为实验材料，对冰冻切片的操作步骤进行了较为详细的介绍。

Keywords: 小鼠 search 脑组织 search 冰冻切片 search

材料与试剂

  1. 沉糖后脑组织 (图1A)
  2.  长方体模具 (2×1.5×1.1cm，不锈钢)
  3.  48孔板 (海门)
  4. 铝箔纸 (佳能)
  5. 解剖镊 (瑞沃德)
  6.  防卷板 (Leica, 14047742497)
  7. 切片刀 (Leica, 819)
  8.  细毛笔 (HWAHONG)
  9.  OCT (optimum cutting temperature) 包埋剂 (SAKURA, 4583)
  10. 封口膜 (Bemis, PM996)
  11.  载玻片 (世泰)
  12.  PBS (见溶液配方)

仪器设备

  1.  冰冻切片机 (Leica, CM1950) (图1 B-C)
  2.  移液枪 (Eppendorf)


    图1. 实验用品与设备. A. 实验所需材料. B-C. 冰冻切片机控制面板. D. 手轮解锁. E. 手轮上锁。

实验步骤

Copyright: © 2021 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：王雅娜, 田雨, 何苗, 龚玲. (2021). 小鼠脑组织冰冻切片. Bio-101: e1010819. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010819.
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分类

神经科学 > 基础技术 > 快速制片

生物科学 > 生物技术

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