研究背景

细胞RNA-FISH是研究目的RNA在细胞中定位的技术，其依据的实验原理是碱基互补配对原则，用带有荧光基团标记的探针去结合细胞中的靶标RNA，最后使用共聚焦显微镜观察荧光信号来确定目的RNA在细胞中的分布。RNA-FISH技术为研究RNA的功能提供了有力的科研工具，在基因诊断、肿瘤遗传学、病毒感染分析等方面发挥了重要的作用 (Cui et al., 2016)。

材料与试剂

1. 12孔细胞培养皿 (Thermo Fisher, catalog number: 150628)
2. 胰酶 (Thermo Fisher, catalog number: 25200072)
3. 移液器枪头 (Axygen, catalog number: T-200-Y)
4. 载玻片 (CITOTEST, catalog number: 188105W)
5. 细胞培养皿盖玻片 (Thermo Fisher, catalog number: H18200)
6. 封口膜 (Parafilm, catalog number: PM996)
7. 1× PBS缓冲液 (Hyclone, catalog number: SH30256.01)
8. 70% 乙醇 (VWR International, catalog number: BDH1164-4LP)
9. 靶向目标RNA的探针 (奥科生物技术有限公司)
10. 37%甲醛 (Richard-Allan Scientific, catalog number: 9311)
11. 20 × SSC溶液 (Ambion, catalog number: AM9765)
12. 甲酰胺 (Ambion, catalog number: AM9342)
13. 硫酸葡聚糖 (Amresco, catalog number: 0198)
14. 封片液 (Invitrogen, catalog number: P36961)
15. DAPI (Invitrogen, catalog number: D1306)
16. 固定液 (见溶液配方)
17. 洗涤缓冲液 (见溶液配方)
18. 杂交液 (见溶液配方)
    

仪器设备

1. 移液器 (Eppendorf，catalog number: 3120000070)
2. 摇床 (其林贝尔，catalog number: TS-1)
3. 4 °C冰箱 (海尔)
4. 37 °C培养箱 (上海一恒，catalog number: LRH-70F)
5. 共聚焦显微镜 (奥林巴斯，catalog number: FV500)
   

实验步骤