Interaction Analysis Between Nucleic and Protein Using SPR Technology

材料与试剂

1. 无盖1.5 ml EP管（Cytiva，货号：BR-1002-87）
2. 96孔板（Cytiva，货号：BR-1005-03）
3. 96孔板封口膜（Cytiva，货号：28-9758-16）
4. S系列SA芯片（Cytiva，货号：29-1049-92（一片装）/BR-1005-31（三片装）)
5. 缓冲液：10x HBS-EP+ （Cytiva，货号：BR-1006-69）
6. 去离子水（用0.22 μm膜过滤）。
7. 生物素化修饰的核酸配体Lac O1：商业化合成的粉末，用水稀释到100 μg/ml，分装保存在-20 °C。对合成的核酸需要确认碱基组成和核酸的完整性，以及生物素化修饰的比例和纯度（本实验使用的生物素化修饰核酸由金唯智生物技术有限公司合成）。注：核酸的空间二级或三级结构可能对分析物的结合是至关重要的（如 DNA、RNA适配体，双链DNA等），需要采用加热变性和缓慢冷却复性来保证核酸的结合活性。
8. Lac I蛋白分析物：母液浓度至少为10 μM，样品体积在50 μl以上，纯度>90%。（Novoprotein, #CG57）在选择蛋白供应商时，客户需要确认蛋白的活性，如需脱盐，可选择PD MiniTrapTM G-25（Cytiva，货号28-9180-07）或PD-10 Desalting（Cytiva，货号17-0851-01）。
   

仪器设备

1. Biacore T200生物分子相互作用系统（Cytiva，货号：28975001）

实验步骤