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海洋微藻中脂质体含量的流式检测

Flow Cytometric Determination of Lipid Content in Marine Microalgae

钟 钟春莲*
卢 卢余盛*
贾 贾力
陈 陈建明

*Contributed equally to this work 发表时间: 2019年11月20日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010350 浏览次数: 6934

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流式细胞术实验手册
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摘要：微藻脂质体，俗称微藻油，其中富油微藻可作为一种新型的生物柴油来源，对其有效的开发和利用可缓解全球石油供缺问题。本文采用尼罗红 (NR) 染料对微藻中油脂染色，通过流式细胞仪检测荧光强度，从而快速、准确的测定微藻中脂质体含量，筛选富含脂质体的微藻，即富油微藻。

Keywords: 微藻脂质体 search 尼罗红 search 流式细胞术 search

材料与试剂

  1. 70 μm细胞过滤器 (Beyogold, catalog number: FSTR040)
  2. 流式管 (BD Falcon, catalog number: BD 352054)
  3. 斜生栅藻 (Scenedesmus obliquus，JNU20)
  4. 尼罗红 (Solarbio, catalog number: N8440)
  5. PBS (pH = 7.2~7.4, Solarbio, catalog number: P1020)
  6. DMSO (Solarbio, catalog number: D8370)
  7. 硝酸钠
  8. 磷酸氢二钾
  9. 七水硫酸镁 
  10. 二水氯化钙
  11. 柠檬酸
  12. 柠檬酸铁铵 
  13. EDTA二钠
  14. 碳酸钠
  15. 硼酸
  16.  四水氯化锰
  17. 七水硫酸锌
  18. 二水钼酸钠
  19. 五水硫酸铜
  20.  六水硝酸钴
  21. 盐酸
  22. 氯仿
  23. 尼罗红试剂 (见溶液配方)
  24. BG-11培养基 (见溶液配方)
  25. 1,000x 微量元素 (见溶液配方)

仪器设备

  1. 柱光生物反应器 (ψ3 cm × 30 cm, 玻璃材质)
  2. 微波炉 (美的，model: M1-211A)
  3. 高压灭菌锅 (德国爱安姆高压灭菌器，model: L65)
  4. 流式细胞仪 (美国BD公司，model: FACS AriaIII)
  5. 低速离心机 (中科中佳科学仪器公司，model: LX-200)
  6. 小型低温高速离心机 (德国Eppendorf公司，model: 5424R)
  7. -80 °C冰箱 (中国海尔集团，model: DW-86L388)

实验步骤

Copyright: © 2019 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：钟春莲, 卢余盛, 贾力, 陈建明. (2019). 海洋微藻中脂质体含量的流式检测. Bio-101: e1010350. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010350.
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How to cite: Zhong, C. L., Lu, Y. S., Jia, L. and Chen, J. M. (2019). Flow Cytometric Determination of Lipid Content in Marine Microalgae. Bio-101: e1010350. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010350.
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分类

细胞生物学 > 单细胞分析 > 流式细胞术

微生物学 > 微生物新陈代谢 > 脂质

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