基于荧光染料的珊瑚共生菌的群落组成及表型检测

卢余盛; 钟春莲; 贾力; 陈建明

doi:10.21769/BioProtoc.1010347

Improve Research Reproducibility A Bio-protocol resource

基于荧光染料的珊瑚共生菌的群落组成及表型检测

Community Composition and Phenotypic Detection of Coral Symbiotic Bacteria Based on Fluorescent Dyes

*Contributed equally to this work 发表时间: 2019年11月20日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010347 浏览次数: 3450

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摘要: 海洋珊瑚生态系统具有极高的生物多样性和经济价值，随着珊瑚白化率的增加，其生态系统逐渐受损，其中与其共生的微生物参与了白化过程，与珊瑚的白化程度密切相关。本文利用荧光染料对珊瑚共生虫黄藻和其他刺胞动物细胞群进行染色，通过流式细胞仪对细胞群进行分类和表型检测，对于珊瑚白化程度可进行早期检测。

Keywords: 珊瑚细胞

材料与试剂

流式管 (美国BD公司，catalog number: 352054)
FACS Clean (美国BD公司，catalog number: 334030)
CS&T微球 (美国BD公司，catalog number: 641319)
LysoTracker Deep Red (美国Thermo Fisher Scientific，catalog number: L12492)
CellROX Green (美国Thermo Fisher Scientific，catalog number: C10492)
DAPI (美国Thermo Fisher Scientific，catalog number: D1306)
台盼蓝 (Solarbio, catalog number: C0040)
无水乙醇 (国药集团，catalog number: 10009259)
FBS (美国Thermo Fisher Scientific，catalog number: 10100147C)
HEPES (美国Thermo Fisher Scientific，catalog number: 15630080)
氯化钾
磷酸二氢钾
氯化钠
十二水合磷酸氢二钠
3.3× PBS (见溶液配方
染色缓冲液 (见溶液配方)
75% 乙醇 (见溶液配方)
DAPI储存液 (见溶液配方)
CellROX Green工作液 (见溶液配方)
LysoTracker Deep Red工作液 (见溶液配方)

仪器设备

流式细胞仪 (美国BD公司，model: FACSAriaIII)
小型低温高速离心机 (德国Eppendorf公司，model: 5424R)
-80 °C冰箱 (中国海尔集团，model: DW-86L388)
超声波清洗仪 (中国波达公司，model: 1200)
血球计数板
高压蒸汽灭菌锅

实验步骤

引用格式：卢余盛, 钟春莲, 贾力, 陈建明. (2019). 基于荧光染料的珊瑚共生菌的群落组成及表型检测. Bio-101: e1010347. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010347.

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How to cite: Lu, Y. S., Zhong, C. L., Jia, L. and Chen, J. M. (2019). Community Composition and Phenotypic Detection of Coral Symbiotic Bacteria Based on Fluorescent Dyes . Bio-101: e1010347. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010347.

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