摘要:海洋病毒是海洋环境中数量最多的生物群类,每毫升海水中病毒浓度通常为10
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8个,在海洋生态系统中具有重要作用,可以促进生物进化、推动生物地球化学循环、构建浮游生物群落、调节水平基因转移等。因此,通过流式细胞仪分析海洋病毒的丰度和类型对于海洋生态系统多样性的研究具有重要意义。本文通过SYBR Green I法对海水中浮游病毒丰度和病毒类型进行分析。
材料与试剂
- 流式管 (美国BD公司,catalog number: 352054)
- 颗粒大小荧光标准微球 (美国Invitrogen™公司,catalog number: F13839)
- CS&T微球 (美国BD公司,catalog number: 641319)
- 10,000× SYBR Green I荧光染料 (Solarbio, catalog number: SY1020)
- FACS Clean (美国BD公司,catalog number: 334030)
- 无水乙醇 (国药集团,catalog number: 10009259)
- 无菌PBS (pH=7.2~7.4) (Solarbio, catalog number: P1020)
- Tris-EDTA溶液 (pH = 8.0, Sigma-Aldrich, catalog number: 93283)
- 50% 的戊二醛溶液 (Sangon Biotech, catalog number: A500484)
仪器设备
- 流式细胞仪 (美国BD公司,model: FACS AriaIII)
- 小型低温高速离心机 (德国Eppendorf公司,model: 5424R)
- -80 °C冰箱 (中国海尔集团,model: DW-86L388)
- 超声波清洗仪 (中国波达公司,model: 1200)
实验步骤
Copyright: © 2019 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
分类
细胞生物学 > 单细胞分析 > 流式细胞术
微生物学 > 微生物细胞生物学 > 细胞染色
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