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小鼠骨髓造血干细胞流式分析

Flow Cytometry Analysis of Mouse Bone Marrow Hematopoietic Stem Cells

谢 谢嘉怡
王 王瑨
赵 赵萌

发表时间: 2019年11月20日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010339 浏览次数: 14105

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流式细胞术实验手册
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摘要：造血干细胞 (Hematopoietic Stem Cells， HSCs) 是具有长期自我更新，以及分化为各类成熟血细胞能力的成体干细胞。本文以小鼠骨髓组织为例，使用7色共14种抗体，标记出在骨髓细胞中的造血干细胞。用此法标记的HSCs还可进行细胞周期、凋亡等实验，并可用于分选实验。

Keywords: 小鼠 search 造血干细胞 search 流式细胞术 search

材料与试剂

  1. 15 ml离心管
  2. 1.5 ml EP管
  3. 70 μm滤膜 (Fisherbrand, catalog number: 22363548)
  4. 小鼠 (C57BL/6J，6~8周龄，雄雌各半)
  5. 胎牛血清 (FBS, Gibco，catalog number: 10100147)
  6. 流式抗体，见表1

    表1. 流式抗体


  7. 同型对照及单标抗体，见表2

    表2. 同型及单标抗体


  8. 磷酸缓冲液 (10x PBS, Sangon biotech, catalog number: E607016-0500)
  9. 氯化铵 (天津大茂化学，catalog number: 12125-02-9)
  10. 碳酸氢钠 (Sigma-Aldrich, catalog number: S5761，500 G)
  11. EDTA粉末 (鼎国，catalog number: LE568)
  12. 磷酸缓冲液 (1x PBS) (见溶液配方)
  13. 红细胞裂解液 (500 ml) (见溶液配方)

仪器设备

  1. 离心机 (Eppendorf, catalog numbers: 5804R, 5424R)
  2. 移液器
  3. 水浴锅
  4. 摇床
  5. 流式细胞仪 (Thermo fisher scientific, Attune NxT)

实验步骤

Copyright: © 2019 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：谢嘉怡, 王瑨, 赵萌. (2019). 小鼠骨髓造血干细胞流式分析. Bio-101: e1010339. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010339.
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How to cite: Xie, J. Y., Wang, J. and Zhao, M. (2019). Flow Cytometry Analysis of Mouse Bone Marrow Hematopoietic Stem Cells. Bio-101: e1010339. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010339.
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分类

细胞生物学 > 单细胞分析 > 流式细胞术

干细胞 > 成体干细胞 > 造血干细胞

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