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小鼠骨髓红细胞分化阶段分析

Flow Cytometry Analysis of Stages of Mouse Erythroid Differentiation in Bone Marrow

谢 谢嘉怡
王 王瑨
赵 赵萌

发表时间: 2019年11月20日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010337 浏览次数: 7896

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流式细胞术实验手册
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摘要：红细胞是血液中数量最多的血细胞，是脊椎动物体内通过血液运送氧气最主要的媒介。红细胞成熟过程主要发生在骨髓内，原始红细胞是有核细胞，在成熟过程中，其细胞核逐渐消失，细胞骨架发生改变，逐渐形成双凹圆盘状的成熟红细胞并释放到外周血中。研究发现，Ter-119、CD71、CD44等细胞表面分子标记可反映红细胞发育不同阶段，故本文以小鼠骨髓组织为例，使用3种带不同荧光标记对的抗体，结合细胞大小，对骨髓细胞中5个阶段的红细胞进行标记。

Keywords: 小鼠 search 造血祖细胞 search 红系分化 search 流式细胞术 search

材料与试剂

  1. 15 ml离心管
  2. 50 ml离心管
  3. 1.5 ml EP管
  4. 70 μm滤膜 (Fisherbrand, catalog number: 22363548)
  5. 小鼠 (C57BL/6J，6~8周龄，雄雌各半)
  6. 胎牛血清 (FBS, Gibco, catalog number: 10100147)
  7. 流式抗体如表1

    表1. 流式抗体
  8. 磷酸缓冲液 (10x PBS, Sangon biotech, catalog number: E607016-0500)
  9. 磷酸缓冲液 (1x PBS) (见溶液配方)
  10. 红细胞形成抗体混合液 (见溶液配方)

仪器设备

  1. 离心机 (Eppendorf, catalog numbers: 5804R, 5424R)
  2. 移液器
  3. 水浴锅
  4. 摇床
  5. 流式细胞仪 (Thermo fisher scientific, Attune NxT)

实验步骤

Copyright: © 2019 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：谢嘉怡, 王瑨, 赵萌. (2019). 小鼠骨髓红细胞分化阶段分析. Bio-101: e1010337. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010337.
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How to cite: Xie, J. Y., Wang, J. and Zhao, M. (2019). Flow Cytometry Analysis of Stages of Mouse Erythroid Differentiation in Bone Marrow. Bio-101: e1010337. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010337.
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分类

细胞生物学 > 单细胞分析 > 流式细胞术

免疫学 > 抗体分析 > 抗体检测

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