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果蝇血细胞流式分析及敲除方法

The Drosophila Hemocytes Ablation Method and Flow Detection Assay

俞 俞珺璟
潘 潘磊

发表时间: 2019年11月20日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010322 浏览次数: 5857

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流式细胞术实验手册
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摘要：果蝇作为经典的模式动物，拥有其他生物无法比拟的遗传学操作优势。除此之外，伴随着生物学技术的发展，如何将现代生物学技术和传统的遗传操作相结合，可能是果蝇这种模式生物迎来新发展的契机。这里我们以果蝇血液系统为例，结合血细胞特异性表达的UAS-GAL4遗传系统，描述如何利用流式细胞术分析果蝇的外周血。

Keywords: 果蝇 search 血细胞 search 流式细胞术 search

材料与试剂

  1. 1.5 ml离心管
  2. 40 μm滤膜 (Falcon, catalog number: 352340)
  3. 5 ml流式管 (Falcon, catalog number: 352008)
  4. 35 mm培养皿 (Falcon, catalog number: 353001)
  5. 三龄幼虫 (Third instar wandering larvae)
  6. 果蝇：he-gal4, UAS-GFP (Bloomington 8700)，UAS-reaper (DGRC 108-447)
  7. DAPI (Sigma-Aldrich, catalog number: D9542)
  8. Na2HPO4
  9. NaCl
  10. KCl
  11. KH2PO4 
  12. Protease inhibitors cocktail (Roche, catalog number: REF04693116001)
  13. PBS (见溶液配方)
  14. 解剖液 (见溶液配方)

仪器设备

  1. 视镜 (Leica，S6)
  2. 解剖镊 (FST by Dumont Biology SWITZERLAND, #5)
  3. 流式细胞分析仪 (BD LSRFortessa)

实验步骤

Copyright: © 2019 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：俞珺璟, 潘磊. (2019). 果蝇血细胞流式分析及敲除方法. Bio-101: e1010322. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010322.
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How to cite: Yu, J. J. and Pan, L. (2019). The Drosophila Hemocytes Ablation Method and Flow Detection Assay. Bio-101: e1010322. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010322.
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分类

细胞生物学 > 单细胞分析 > 流式细胞术

免疫学 > 动物模型 > 果蝇

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