Improve Research Reproducibility A Bio-protocol resource

病毒的流式检测

Flow Cytometric Analysis of Virus

闵 闵娟
关 关武祥

发表时间: 2019年11月20日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010318 浏览次数: 7509

返回专辑目录

流式细胞术实验手册
pdf PDF PDF
ask 提问与回复
引用
收藏
被引用
摘要：流式细胞术 (FCM) 可通过分析受感染细胞来间接检测病毒或其抗原，然而该方法存在测量过程繁琐、耗时长、误差大等缺点。伴随FCM的不断发展，其检测范围已不再局限于细胞，目前已可利用流式细胞仪直接分析各类形态和基因组大小各异 (直径范围：100~200 nm) 的病毒，如杆状病毒、带状疱疹病毒、HIV-1病毒等。跟病毒的其他检测方法相比，FCM法具有重复性好、简便快速、可获取多参数信息等优势。除此之外，FCM得到的荧光分布结果还可进一步用于病毒蛋白合成及病毒颗粒释放等数据的统计估算和数学建模。本文以含有GFP荧光蛋白的HIV慢病毒为例，简要介绍一种利用FCM对其进行检测的方法。

Keywords: 流式细胞仪 search GFP荧光蛋白 search HIV慢病毒 search 检测 search

材料与试剂

  1. 过滤器
  2. 慢病毒包装系统 (GeneCopoeia, catalog number: HPK-LvTR-20)
  3. 聚苯乙烯绿色荧光微球 (Invitrogen, catalog number: F13839)
  4. HEK293 T细胞 (ATCC)
  5. 超纯水 (Milli-Q水)
  6. Opti-MEM培养基 (Gibco, catalog number: 51985091)
  7. 多聚甲醛 (Sigma-Aldrich, catalog number: 16005-1KG-R)
  8. 磷酸钙
  9. 20%蔗糖溶液
  10. p24 ELISA试剂盒
  11. KH2PO4
  12. Na2HPO4
  13. NaCl
  14. KCl
  15. 盐酸
  16. 磷酸缓冲液 (1× PBS) (见溶液配方)

仪器设备

  1. 超速离心机 (Beckman, model: Optima XPN-100)
  2. 流式细胞仪 (BD, model: FACSAria SORP)

软件

  1. FlowJo v10.0.8软件

实验步骤

Copyright: © 2019 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：闵娟, 关武祥. (2019). 病毒的流式检测. Bio-101: e1010318. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010318.
ris ris 下载引用格式
How to cite: Min, J. and Guan, W. X.  (2019). Flow Cytometric Analysis of Virus. Bio-101: e1010318. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010318.
ris ris Download Citation in RIS Format

分类

细胞生物学 > 单细胞分析 > 流式细胞术

微生物学 > 微生物细胞生物学 > 基于细胞的分析方法

您对这篇实验方案有问题吗？

在此处发布您的问题，我们将邀请本文作者来回答。同时，我们会将您的问题发布到Bio-protocol Exchange，以便寻求社区成员的帮助。

post 发布问题
0 Q&A