Improve Research Reproducibility A Bio-protocol resource

细菌的流式检测

Flow Cytometric Analysis of Bacteria

闵 闵娟
关 关武祥

发表时间: 2019年11月20日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010317 浏览次数: 9457

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流式细胞术实验手册
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摘要：传统的细菌检测 (如平板法和显微技术) 耗时长、误差大、操作繁琐并且无法提供细菌种属和生物学状态信息。近年来，随着荧光染料、结构光学和流式细胞检测仪自身的不断发展，利用流式细胞术 (FCM) 检测细菌等微生物成为可能。与传统细菌检测方法相比，FCM具有灵敏、快速、精确、高效的优势，同时结合其多参数数据采集特点，FCM可提供多种细菌的生物学信息，在实验室研究、临床诊断、工业生产、环境监测等众多领域极具应用前景。本方案以污水中的大肠杆菌( E. coli )为例，介绍如何利用FCM分析零价铁基微球 (A-mZVI) 对其灭活去污效果。

Keywords: 细菌 search 大肠杆菌 search 零价铁基微球 search 流式细胞仪 search

材料与试剂

  1. 零价铁基微球 (自制)
  2. E. coli (Coli Genetic Stock Center)
  3. 无水氯化亚铁 (FeCl2，国药集团，catalog number: XW77589431)
  4.  乙二胺 (EDA，国药集团，catalog number: 10009518)
  5. 硼氢化钠 (NaBH4，国药集团，catalog number: 80115816)
  6. 氩气 (武汉祥云化工有限公司)
  7. 无水乙醇 (EtOH，国药集团，catalog number: XW00641752)
  8. 去离子水 (18.2 MΩ•cm，由Milli-Q Gradient System制取)
  9. LIVE/DEAD BacLight Bacterial Viability Kit (Invitrogen, catalog number: L-13152)
  10. 0.85% NaCl缓冲液
  11. LB培养基
  12. PBS溶液

仪器设备

  1.  高压灭菌锅 (Zealway)
  2.  N52 NdFeB磁铁 (K&J Magnetics)
  3. 流式细胞仪 (BD, model: FACS AriaⅢ)
  4. 恒温振荡器 (倍英，model: THZ-D)
  5. 细菌培养箱
  6. 比浊仪 (上海昕瑞，model: WGZ-2XJ)
  7. 隔水式恒温培养箱 (GNP-9160)
  8.  离心机
  9. 低温冰箱

软件

  1. FlowJo软件

实验步骤

Copyright: © 2019 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：闵娟, 关武祥. (2019). 细菌的流式检测. Bio-101: e1010317. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010317.
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How to cite: Min, J. and Guan, W. X.  (2019). Flow Cytometric Analysis of Bacteria. Bio-101: e1010317. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010317.
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分类

细胞生物学 > 单细胞分析 > 流式细胞术

微生物学 > 微生物细胞生物学 > 基于细胞的分析方法

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