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初始CD4+ T细胞体外诱导分化为Th1, Th2, Th17和Treg细胞

In vitro differentiation of naïve CD4+ T cells into Th1, Th2, Th17 and Treg cells

鲍 鲍温洁

发表时间: 2019年11月20日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010309 浏览次数: 15938

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流式细胞术实验手册
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摘要：初始CD4+ T细胞具备增殖并且分化成Th1，Th2，Th17和Treg细胞的潜能。使用细胞因子体外刺激初始CD4+T细胞的方法，用于研究不同处理条件对于初始CD4+ T 细胞分化能力的影响 (Cote-Sierra等, 2004)。

Keywords: 初始CD4+ T细胞 search Th1细胞 search Th2细胞 search Th17细胞 search Treg细胞 search

材料与试剂

  1. 96孔板
  2. Dynabeads mons t activator CD3/CD28 (Gibco, catalog number: 11452D)
  3. Purified NA/LE hamster anti mouse CD3e (BD, catalog number: 553057)
  4. Purified NA/LE hamster anti mouse CD28 (BD, catalog number: 553294)
  5. Anti-mouse IL-4 (BD, catalog number: 554434)
  6. Murine IL-12 (Pepro Tech, catalog number: 2101210)
  7. Murine IL-2 (Pepro Tech, catalog number: 2121220)
  8. Murine IL-4 (Pepro Tech, catalog number: 214145)
  9. Anti- mouse IFN-γ (BD, catalog number: 551216)
  10. Anti- mouse IL-12 (BD, catalog number: 551219)
  11. Murine IL-6 (Pepro Tech, catalog number: 21616)
  12. Human TGF-β1 (Pepro Tech, catalog number: 10021C10)
  13. Murine TNF-α (Pepro Tech, catalog number: 31501A5)
  14. Murine IL-1β (Pepro Tech, catalog number: 21111B)
  15. EasysepTM mouse naïve CD4+ T cells isolation kit (Stem cell, catalog number: 19725A)
  16. β-Mercaptoethanol (Millipore, catalog number: ES007E)
  17. PBS
  18. 1640培养基
  19. IMDM培养基 
  20. 谷氨酰胺
  21. 双抗
  22. 1640完全培养基 (见溶液配方)
  23. IMDM完全培养液 (见溶液配方)

仪器设备

  1. 细胞培养箱 (Thermo Fisher Scientific)
  2. FACS LSR II流式细胞仪 (Becton Dickinson)

实验步骤

Copyright: © 2019 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：鲍温洁. (2019). 初始CD4+ T细胞体外诱导分化为Th1, Th2, Th17和Treg细胞. Bio-101: e1010309. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010309.
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How to cite: Bao, W. J. (2019). In vitro differentiation of naïve CD4+ T cells into Th1, Th2, Th17 and Treg cells. Bio-101: e1010309. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010309.
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分类

细胞生物学 > 单细胞分析 > 流式细胞术

免疫学 > 免疫细胞分化 > T 细胞

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