摘要：流式细胞术 (Flow Cytometry) 是通过带有荧光标记的抗体与细胞标志物的特异性结合，从而在单细胞水平上对标志物进行定量分析或分选的技术。基于蛋白标志物的表达位置是细胞表面还是细胞内部，一般有两种染色方式，对于细胞表面的蛋白标志物，多使用偶联荧光基团的特异性抗体来结合目的蛋白，流式细胞仪可以通过对荧光表达的检测来对细胞标志物的表达进行分析。对于细胞内部的蛋白标志物，需要对细胞先进行固定和穿膜通透，再通过一抗特异性结合目的蛋白，之后利用带有荧光基团的二抗特异性结合一抗，才能通过流式细胞仪检测相应荧光并对细胞标志物的表达进行分析。人类多能干细胞 (human pluripotent stem cells, hPSCs)，包括人胚胎干细胞 (human embryonic stem cells, hESCs) 和人诱导多能干细胞 (human induced pluripotent stem cells, hiPSCs)，具有体外无限增殖和分化为各种细胞的潜能，表达于人类ESC/iPSC的标志物包括：SSEA3 (stage-specific embryonic antigen-3)，SSEA4 (stage-specific embryonic antigen-4)，TRA-1-60 (tumor-related antigen-1-60)，TRA-1-81 (tumor-related antigen-1-81)，OCT4，SOX2，NANOG等 (Zhao 等, 2012 )，通常情况下，我们通过流式细胞术检测SSEA3，SSEA4和TRA-1-60，TRA-1-81这两组表面蛋白标志物来对细胞进行定性分析。本文以人类胚胎干细胞H9 ES细胞系为例，用偶联不同荧光基团的抗体分别标记SSEA3，SSEA4和TRA-1-60，TRA-1-81，通过流式细胞仪对两组蛋白标志物进行检测和分析。

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