果蝇肠上皮损伤再生模型实验方法

胡九龙; 袭荣文

doi:10.21769/BioProtoc.1010303

Improve Research Reproducibility A Bio-protocol resource

果蝇肠上皮损伤再生模型实验方法

A Method for Damage-induced Regeneration of the Intestinal Epithelium in Drosophila

胡胡九龙

袭袭荣文

发表时间: 2019年06月20日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010303 浏览次数: 7060

返回专辑目录

PDF

提问与回复

引用

被引用

摘要：葡聚糖硫酸钠 (dextran sulphate sodium，DSS) 是葡聚糖的聚阴离子衍生物，已被广泛用于建立结肠炎的动物模型。给果蝇喂食DSS同样能诱导果蝇肠道炎症和损伤，随后激活肠道干细胞加速肠道上皮增生和修复。DSS诱导的肠道损伤和再生模型为研究干细胞的调控及上皮的再生机制提供了一个相对简单的实验动物模型。

Keywords: 果蝇

肠上皮

DSS

再生

材料与试剂

色谱层析滤纸 (chromatography paper, Fisher, Code: 69)
载玻片 (Fan Yi, catalog number: 7105P)
盖玻片 (Henso, catalog number: 7201)
培养瓶 (BIOLOGIX, catalog number: 51-0500)
EP管 (美国AXYGEN公司，catalog number：MCT-200-C)
3~5天的雌果蝇
DSS (36,000~50,000 M.Wt., MP Biomedicals, catalog number: 9011-18-1)
葡萄糖 (Sigma-Aldrich, catalog number: S7903)
实验用抗体：
Anti-Prospero(DSHB，MR1A)
Goat anti-mouse IgG conjugated to Alexa 568 (Molecular Probes, catalog number: A11036)
酵母 (英国OXOID公司，catalog number：LP0021)
PBS (Solarbio, catalog number: P1020)
DAPI (Sigma-Aldrich, catalog number: D9542)
37%多聚甲醛 (Sigma-Aldrich, catalog number: F1635)
正庚烷 (国药集团化学试剂有限公司，catalog number: 80066918)
甲醇 (北京化工厂，catalog number：B0301005)
羊血清 (NGS, Cell Signaling Technology, catalog number: 5425)
Triton X-100 (Sigma-Aldrich, catalog number: T9248)
5% DSS溶液 (见溶液配方)
5%葡萄糖溶液 (见溶液配方)
封片溶液 (见溶液配方)
PBT溶液 (见溶液配方)

仪器设备

电子天平 (无锡英衡电子有限公司)
移液枪 (法国GILSON PIPETMAN)
镊子 (瑞士Dumont公司)
摇床 (上海智城分析仪器制造有限公司)
通风橱 (北京中联科仪科技有限公司)
4 °C冰箱 (中国海尔集团)
显微镜 (Nikon A1-R confocal microscope)

实验步骤

引用格式：胡九龙, 袭荣文. (2019). 果蝇肠上皮损伤再生模型实验方法. Bio-101: e1010303. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010303.

下载引用格式

How to cite: Hu, J. L. and Xi, R. W. (2019). A Method for Damage-induced Regeneration of the Intestinal Epithelium in Drosophila. Bio-101: e1010303. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010303.

Download Citation in RIS Format

分类

您对这篇实验方法有问题吗？

在此处发布您的问题，我们将邀请本文作者来回答。同时，我们会将您的问题发布到Bio-protocol Exchange，以便寻求社区成员的帮助。

发布问题

0 Q&A