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果蝇脂肪组织高压冷冻-冷冻替代透射电镜 (HPF-FS TEM)

High Pressure Freezing-freezing Substitution Transmission Electron Microscope (HPF-FS TEM) of Drosophila Fat Tissue

丁 丁隆
黄 黄勋

发表时间: 2019年06月20日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010302 浏览次数: 5826

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果蝇实验手册
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摘要：透射电镜可以很好地反映生物学样品超微精细结构，高压冷冻固定比传统的化学固定对组织的原有形态破坏程度低，因而具有更加保真的优势。此实验以果蝇脂肪组织为例描述高压冷冻-冷冻替代透射电镜观察果蝇组织的方法。

Keywords: 高压冷冻固定 search 透射电镜 search 果蝇 search 脂肪组织 search

材料与试剂

  1. 果蝇三龄幼虫
  2. 液氮
  3. 锇酸 (四氧化锇)
  4. 丙酮
  5. 醋酸双氧铀
  6. Embed 812树脂
  7. NaCl
  8. KCl
  9. Na2HPO4
  10. KH2PO4
  11. HCl
  12. 1× PBS (见溶液配方)
  13. 样品替代液 (见溶液配方)

仪器设备

  1. Leica Microsystems HPM 100高压冷冻仪
  2. Leica Microsystems AFS-2冷冻替代仪
  3. Leica Ultracut UCT切片机
  4. JEM-1400 TEM电子显微镜
  5. Gatan832 4k × 2.7k CCD
  6. 烘箱

实验步骤

Copyright: © 2019 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：丁隆, 黄勋. (2019). 果蝇脂肪组织高压冷冻-冷冻替代透射电镜 (HPF-FS TEM). Bio-101: e1010302. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010302.
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How to cite: Ding, L. and Huang, X. (2019). High Pressure Freezing-freezing Substitution Transmission Electron Microscope (HPF-FS TEM) of Drosophila Fat Tissue. Bio-101: e1010302. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010302.
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分类

细胞生物学 > 细胞成像

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