摘要:脂肪组织作为能量调节的重要组织,其氧耗速率可以间接反映代谢状态。本实验利用药物处理结合呼吸追踪指示脂肪组织的线粒体代谢状态 (Ding等,2018)。我们反复试验发现,果蝇幼虫脂肪组织对解偶联剂FCCP几乎没有响应,因此将检测程序简化为一步处理,只检测“基础呼吸水平”和“非线粒体呼吸水平”。
材料与试剂
- 果蝇幼虫
- Schneider's Medium (Gibco, catalog number: 10902-088)
- 丙酮酸钠
- NaOH
- Antimycin A (Sigma)
- Rotenone (Sigma)
- Assay Medium (AM) (见溶液配方)
- Antimycin A/Rotenone混合溶液 (见溶液配方)
仪器设备
- Seahorse XF24 Extracellular Flux Analyzer (Seahorse Bioscience)
- 胰岛板 (Seahorse Bioscience)
- 探针板 (Seahorse Bioscience)
- 水化板 (Seahorse Bioscience)
- CO2培养箱
实验步骤
Copyright: © 2019 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
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