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果蝇肠道感染模型的建立

Intestinal Infection in Drosophila Larvae and Adults

褚 褚珊珊
赵 赵娅娅
潘 潘磊

发表时间: 2019年06月20日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010295 浏览次数: 8680

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果蝇实验手册
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摘要：肠道是机体最大的粘膜免疫层，也是病原和宿主相互斗争的最主要的场所。其中天然免疫应答是机体抵抗外界病原侵染的第一道防线。口服摄入，从而导致的胃肠道感染也是生物体最为普遍的病理模型。因此，建立卓有成效的肠道感染模式生物模型将对充分了解病原菌–宿主互作机制具有重要的意义。果蝇具有同高等动物高度保守的天然免疫通路，以及其他模式生物无法比拟的遗传学操作优势，因此赋予了果蝇被广泛应用于天然免疫的机理研究的能力。这里，我们将详细描述如何在果蝇的成体和幼体肠道中建立病原菌感染模型，以及相应的评价该模型体系的经典指标。

Keywords: 肠道感染 search 黑腹果蝇 search Erwinia carotovora carotovora 15 search Ecc15 search

材料与试剂

  1. 果蝇饲养管
  2. RNase-free EP管
  3. 滤纸
  4. 刷子
  5. 三角瓶
  6. 无菌纱布
  7. CO2麻醉板
  8. 高活性干酵母
  9. 雄性果蝇成虫
  10. Erwinia carotovora carotovora 15 (Ecc15)
  11. 玉米粉
  12. 葡萄糖
  13. 蔗糖
  14. 琼脂粉
  15. 蒸馏水
  16. 氯化钙
  17. 山梨酸钾
  18. 对羟基苯甲酸乙酯
  19. LB
  20. PBS
  21. DEPC
  22. 0.5 mm陶瓷研磨珠
  23. Trizol
  24. 三氯甲烷
  25. 异丙醇
  26. 乙醇
  27. 5× All-In-One RT MasterMix (Abm, catalog number: G490；-20 °C储存)
  28. EvaGreen 2× qPCR MasterMix-Low ROX (Abm, catalog number: MasterMix-LR)
  29. 标准果蝇食物 (见溶液配方)
  30. 尼可净 (见溶液配方)

仪器设备

  1. 光照培养箱
  2. 高通量组织研磨机
  3. -80 °C冰箱
  4. 离心机
  5. 高压灭菌锅
  6. 震荡培养箱
  7. 酶标仪 (Bio-rad)
  8. Real-Time PCR仪 (Applied Biosystems)
  9. NanoDrop 2000 (Thermo Fisher)

软件

  1. GraphPad prism

实验步骤

Copyright: © 2019 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：褚珊珊, 赵娅娅, 潘磊. (2019). 果蝇肠道感染模型的建立. Bio-101: e1010295. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010295.
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How to cite: Chu, S. S., Zhao, Y. Y. and Pan, L. (2019). Intestinal Infection in Drosophila Larvae and Adults. Bio-101: e1010295. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010295.
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分类

免疫学 > 动物模型

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