材料与试剂

1. 1.5 ml离心管
2. 移液器配套枪头
3. 9孔康宁玻璃板
4. 果蝇三龄幼虫
5. 双蒸水
6. 75 mM碳酸铵 (pH 7.4)
7. 葡萄糖 (达到分析纯即可)
8. U-¹³C标记葡萄糖 (CLM-1396-1, Cambridge Isotope Laboratories)
9. 液氮
10. 基础溶液：Schneider's Medium去掉葡萄糖和海藻糖 (见溶液配方)
    1)

    Disodium hydrogen phosphate 磷酸氢二钠
    2)

    Magnesium sulphate heptahydrate 七水硫酸镁
    3)

    Potassium chloride 氯化钾
    4)

    Potassium dihydrogen phosphate 磷酸二氢钾
    5)

    Sodium chloride 氯化钠
    6)

    Glycine 甘氨酸
    7)

    L-Arginine hydrochloride L-精氨酸盐酸盐
    8)

    L-Aspartic acid L-天门冬氨酸
    9)

    L-Cysteine hydrochloride L-半胱氨酸盐酸盐
    10)

    L-Cystine dihydrochloride L-胱氨酸盐酸盐
    11)

    L-Glutamic acid L-谷氨酸
    12)

    L-Glutamine L-谷氨酰胺
    13)

    L-Histidine hydrochloride monohydrate L-一水组氨酸盐酸盐
    14)

    L-Isoleucine L-异亮氨酸
    15)

    L-Leucine L-亮氨酸
    16)

    L-Lysine hydrochloride L-赖氨酸盐酸盐
    17)

    L-Methionine L-甲硫氨酸
    18)

    L-Phenylalanine L-苯丙氨酸
    19)

    L-Proline L-脯氨酸
    20)

    L-Serine L-丝氨酸
    21)

    L-Threonine L-苏氨酸
    22)

    L-Tryptophan L-色氨酸
    23)

    L-Tyrosine disodium salt L-酪氨酸磷酸氢二钠盐
    24)

    L-Valine L-缬氨酸
    25)

    β-Alanine β-丙氨酸
    26)

    α-Ketoglutaric acid α-酮戊二酸
    27)

    Fumaric acid 延胡索酸
    28)

    L-Malic acid L-苹果酸
    29)

    Succinic acid 琥珀酸
    30)

    Yeast extract 酵母提取物

仪器设备

1. 移液器
2. -80 °C冰箱
3. UltiMate 3000液相色谱仪 (Thermo Fisher Scientific)
4. Orbitrap质谱仪 (Q Exactive, Thermo Fisher Scientific)
5. ACQUITY UPLC HSS T3 1.8 μm, 2.1 × 100 mm柱子

实验步骤