摘要:肠道的完整性是衡量个体健康的重要指标之一,与肠道感染、炎症、衰老等生理病理过程密切相关。无论是Crohn肠病和溃疡性肠炎,还是肠道局部恶性增生都会伴随着肠壁结构的破坏,导致肠内容物渗漏至体腔,甚至诱发机体系统性的菌毒血症。果蝇的中肠上皮细胞层可以很好的模拟高等动物的小肠上皮细胞结构,是解析肠道病原-宿主互作过程中肠上皮结构动态平衡的优良场所。本文详细地描述了如何利用蓝精灵(Smurf) 实验,快速简便地评判果蝇肠道的完整性。以非可代谢性蓝色染料溶液饲喂果蝇,通过观察染料在果蝇体内的浸透性,来判断果蝇肠道完整度 (Rera等,2012)。如果蝇肠道出现渗漏,饲喂后的蓝色染料将从肠道渗漏至全身;反之,蓝色染料只会存在于消化道中,不会扩散。因此,蓝精灵实验可以作为评判肠道生理病理变化的指标之一。
材料与试剂
- 0.22 μm滤膜 (Millipore,SLGV033RB)
- 滤纸
- 成虫果蝇或三龄幼虫
- Sucrose (Sigma, catalog number: S0389)
- 可食用蓝色染料 (CareTM亮蓝特浓级85%,OC BB 85%)
- DSS (MP,160110)
- 5%蔗糖溶液 (见溶液配方)
- Smurf染料溶液 (见溶液配方)
- 5% DSS溶液 (见溶液配方)
仪器设备
- 体视镜 (Leica,S6)
实验步骤
Copyright: © 2019 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
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