摘要:果蝇Schneider 2 (S2) 细胞系是从果蝇早期胚胎分离出来的一类血淋巴细胞,也是果蝇仅有的能进行细胞实验的几种细胞系中最常见的一种。因此,掌握S2细胞的转染方法对于果蝇细胞生物学研究非常重要。目前,市面上针对S2细胞的脂质体转染试剂相对较少且价格昂贵,转染效率一般也难以超过20%。磷酸钙转染方法成本低廉,并且有着不逊于脂质体转染试剂的效率,是一种性价比非常高的转染方法。
材料与试剂
- 6孔细胞培养板 (Thermo Fisher Scientific, Nunc, catalog number: 140675)
- 24孔细胞培养板 (Thermo Fisher Scientific, Nunc, catalog number: 142475)
- 1.5 ml塑料离心管 (Corning, AXYGEN, catalog number: MCT-150-C)
- 果蝇S2细胞
- 一次性无菌过滤装置 (Thermo Fisher Scientific, Nelgene, catalog number: 1660045)
- CaCl2 (Merck, Sigma-Aldrich, catalog number: 223506)
- NaCl (Merck, Sigma-Aldrich, catalog number: S5886)
- KCl (Merck, Sigma-Aldrich, catalog number: P9333)
- Na2HPO4 (Merck, Sigma-Aldrich, catalog number: S7907)
- Glucose (Thermo Fisher Scientific, Gibco, catalog number: 15023021)
- HEPES (free acid) (VWR Life Science, AMRESCO, catalog number: 0511)
- NaOH (Merck, Sigma-Aldrich, catalog number: 221465)
- 0.25 M CaCl2 (见溶液配方)
- 2× HEPES (见溶液配方)
仪器设备
- 震荡混匀仪 (Vortex) (其林贝尔, model: VORTEX-5)
实验步骤
Copyright: © 2019 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
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