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苹果果肉细胞胶体金免疫电镜观察样品的制备

Sample Preparation of Apple Fruit for Observation of Protein Subcellular Localization by Immunogold Labeling and Electron Microscopy

张凌云 张凌云

发表时间: 2018年08月20日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010242 浏览次数: 4225

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摘要：通过超薄切片，获得细胞水平的结构；同时通过免疫染色，观察目的蛋白在细胞内的定位及变化情况。

Keywords: 胶体金 search 免疫定位 search 细胞 search

材料与试剂

注: 以下试剂除特别说明外，均购自Sigma-Aldrich公司。

  1. 苹果
  2. 多聚甲醛
  3. 戊二醛
  4. PBS (磷酸缓冲液，pH 7.2)
  5. 乙醇
  6. Lowicryl K4M
  7. Formvar膜
  8. 金标羊抗兔抗体 (Amersham Pharmacia Biotech)
  9. 柠檬酸铅
  10. 兔血清
  11. Na2HPO4
  12. KH2PO4
  13. KCl
  14. NaCl
  15. 明胶
  16. BSA
  17. Tween 20
  18. 2% (w/v)醋酸双氧铀 (蒸馏水配制)
  19. 前固定液 (见溶液配方)
  20. 含50 mM甘氨酸缓冲液 (见溶液配方)
  21. PBGT缓冲液 (见溶液配方)

仪器设备

  1. 镍网
  2. 抽气泵
  3. 紫外灯
  4. LKB-8800型切片机
  5. 透射电镜

实验步骤

Copyright: © 2018 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：张凌云. (2018). 苹果果肉细胞胶体金免疫电镜观察样品的制备. Bio-101: e1010242. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010242.
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How to cite: Zhang, L. Y. (2018). (2018). Sample Preparation of Apple Fruit for Observation of Protein Subcellular Localization by Immunogold Labeling and Electron Microscopy. Bio-101: e1010242. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010242.
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分类

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