实验原理:水稻在非生物逆境条件下,体内脯氨酸(proline)含量显著增加。可用磺基水杨酸提取水稻组织中脯氨酸,然后用酸性茚三酮加热处理后,溶液即成红色,再用甲苯萃取使色素全部转移至萃取液中。色素的深浅即表示脯氨酸含量的高低。在520 nm波长下比色测定吸光度,再根据标准曲线计算水稻组织中脯氨酸的含量。
实验目的:通过测定水稻体内脯氨酸含量,反映水稻对非生物逆境的抗性。
材料与试剂
- 10 ml离心管
- 1.5 ml离心管
- 冰醋酸及磷酸
- 甲苯
- 茚三酮
- 磺基水杨酸
- 脯氨酸 (Sigma, USA, catalog number: P0380)
- 酸性茚三酮溶液 (见溶液配方)
- 3%磺基水杨酸 (见溶液配方)
仪器设备
- 100 ml容量瓶及50 ml容量瓶
- 分析天平
- 烧杯
- 剪刀
- 电磁炉
- 分光光度计DU640 (Backman,USA)
实验步骤
Copyright: © 2018 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
分类
植物科学 > 植物生理学 > 非生物胁迫
生物化学 > 其它化合物 > 氨基酸
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