材料与试剂

1. 进口离心管 (RNase-free)
   
2. A4纸
   
3. 切片盒
   
4. 载玻片
   
5. 手帕 (普通无尘手帕，用于拭去载玻片表面灰尘)
   
6. 玻璃瓶
   
7. 纸盒
   
8. 面巾纸
   
9. Parafilm
   
10. 无水乙醇
    
11. 二甲苯
    
12. 石蜡
    
13. 碱水
    
14. DEPC-H₂O
    
15. 0.1% poly-L-lysine溶液 (Sigma或生工，RNase free)
    
16. Tris饱和的苯酚
    
17. 氯仿(CHCl₃)
    
18. NaAc
    
19. DIG RNA Labeling Kit (SP6/T7) (Roche, catalog number: 1 175 025)
    
20. DIG Wash and Block Buffer Set (Roche, catalog number: 1 585 762)
    
21. DNase I (Invitrogen，catalog number: 18068-015)
    
22. EDTA
    
23. LiCl
    
24. 冰乙酸
    
25. NcoI酶 (可根据需要选择其他内切酶)
    
26. SP6转录酶
    
27. SalI酶 (可根据需要选择其他内切酶)
    
28. T7转录酶
    
29. Glycine
    
30. 甲醛
    
31. Tris base
    
32. 浓盐酸
    
33. EDTA-2Na
    
34. NaOH
    
35. MgCl₂·6H₂O
    
36. NaCl
    
37. NaH₂PO₄
    
38. Na₂HPO₄
    
39. Yeast tRNA (Invitrogen, catalog number: 15401029)
    
40. Proteinase K buffer
    
41. Proteinase K (Invitrogen, catalog number: 25530049)
    
42. PBS
    
43. 去离子甲酰胺
    
44. BSA
    
45. Triton X-100
    
46. 50% FAA固定液 (见溶液配方)
    
47. 70% FAA固定液 (见溶液配方)
    
48. 1 M Tris-HCl (pH 7.5) (见溶液配方)
    
49. 1 M Tris-HCl (pH 9.5) (见溶液配方)
    
50. 0.5 M EDTA-2Na pH 8.0 (见溶液配方)
    
51. 1 M MgCl₂ (见溶液配方)
    
52. 5 M NaCl (见溶液配方)
    
53. 20x SSPE pH 7.4 (见溶液配方)
    
54. 10x PBS pH 7.4 (见溶液配方)
    
55. 50%硫酸葡聚糖(Detran sulfate) (见溶液配方)
    
56. 10 mg/ml yeast t-RNA (见溶液配方)
    
57. Proteinase K buffer (见溶液配方)
    
58. 10x Hybridization salts (见溶液配方)
    
59. Prehybridization solution (见溶液配方)
    
60. 1x Blocking buffer (见溶液配方)
    
61. BSA washing buffer (见溶液配方)
    
62. TNM-50 buffer (见溶液配方)
    

仪器设备

1. 脱蜡缸
   
2. 镊子
   
3. 剪刀
   
4. 镊子
   
5. 切片机
   
6. 展片台
   
7. 烘箱
   
8. 超净工作台
   
9. 紫外分光光度计
   
10. -20 °C冰箱
    
11. 冷冻离心机
    

实验步骤