Improve Research Reproducibility A Bio-protocol resource

2 ml离心管法快速制备水稻高质量总DNA

A Rapid Method for Isolation of High-quality Total DNA Using 2 ml Centrifugal Tube

龙 龙湍
杨 杨莹
符 符德保
吴 吴昌银

发表时间: 2018年05月30日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010106 浏览次数: 6082

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实验原理：CTAB (hexadecyltrimethylammonium bromide，十六烷基三甲基溴化铵)，是一种阳离子去污剂，它与DNA结合形成的复合物在高盐溶液中可溶并且稳定存在。在粉碎后的植物叶片组织中加入含有CTAB的抽提缓冲液，可以保持DNA溶解于水相。用氯仿除去蛋白质，多糖和酚类等有机杂质后，在水相中加入异丙醇即可将纯度较高的DNA沉淀出来。
实验目的：快速制备少量可用于酶切连接反应的水稻总DNA。

Keywords: 水稻 search 叶片 search 抽提 search 高质量DNA search

材料与试剂

  1. CTAB (Bio Basic Inc., Canada)
  2. NaCl (国药试剂)
  3. EDTA (天津市天力化学试剂有限公司)
  4. Tris (Angus Chemical Company, USA)
  5. HCl (国药试剂)
  6. RNase A (Invitrogen, USA)
  7. β-巯基乙醇 (Sigma, USA)
  8. 三氯甲烷 (国药试剂)
  9. 异丙醇 (国药试剂)
  10. 液氮 (武汉液氮厂)
  11. 95%乙醇 (国药试剂)
  12. CTAB抽提缓冲液 (见溶液配方)
  13. TE缓冲液 (见溶液配方)

仪器设备

  1. 台式离心机 (Beckman, USA)
  2. 电热恒温培养箱 (SKP-02.3000，黄石市恒丰医疗器械有限公司)
  3. 冰箱 (BCD-243K F&R，新飞)

实验步骤

Copyright: © 2018 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：龙湍, 杨莹, 符德保, 吴昌银. (2018). 2 ml离心管法快速制备水稻高质量总DNA. Bio-101: e1010106. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010106.
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How to cite: Long, T., Yang, Y., Fu, D. B. and Wu, C. Y. (2018). A Rapid Method for Isolation of High-quality Total DNA Using 2 ml Centrifugal Tube. Bio-101: e1010106. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010106.
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分类

分子生物学 > DNA > DNA 提取

植物科学 > 植物分子生物学 > DNA

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