材料与试剂

1. 两个玻璃盘 (强烈建议用两个玻璃盘，而不要用搪瓷盘来洗胶，搪瓷盘较小且边沿不圆滑，操作时容易弄破凝胶)
   
2. 一个搪瓷盘 (用来放一些杂物，如垫片等)
   
3. 玻璃棒，玻璃板
   
4. 铲胶板，吸水纸，尺子，铅笔，小刀，一个300 g的重物 (最好重量比较分散)
   
5. 两张用作盐桥的滤纸 (如果是19.5 cm x 10 cm的标准尼龙膜，建议滤纸尺寸为35 cm x 14.5 cm) 以及两张覆盖膜的滤纸，比膜的长、宽各略大0.5 cm即可
   
6. Klenow 酶(1 U/µl) (试剂盒)
   
7. Tris (Sigma, catalog number: T-1378, FW 121.1)
   
8. 硼酸
   
9. EDTA
   
10. NaAC·3H₂O
    
11. 冰醋酸
    
12. Agarose (Biowest, Lot: 122000)
    
13. Hind III (Takara)
    
14. Agarose (Invitrogen, catalog number: 75510-019)
    
15. λDNA Marker (λ-EcoR14 I digest) (Takara, catalog number: CK1801E)
    
16. 浓HCl (中平能化集团开封东大化工有限公司试剂厂)
    
17. 溴酚蓝
    
18. NaCl (国药)
    
19. NaOH (国药)
    
20. Tris (Trizona base)
    
21. Tris-sodian citrate (柠檬酸钠) (国药)
    
22. SDS (Bio Basic Inc., LJ0303B7011J)
    
23. Southern Blot Hybridization Buffer
    
24. Random Primer DNA Labeling Kit Ver 2.0 (Takara, Lot BK3201)
    
25. TE buffer
    
26. 10х TAE buffer (见溶液配方)
    
27. TBE buffer (见溶液配方)
    
28. Depurination Solution (见溶液配方)
    
29. Denaturation buffer (见溶液配方)
    
30. Neutralization buffer(见溶液配方)
    
31. Nucleic acid transfer buffer (20x SSC) (见溶液配方)
    
32. Southern Blot Hybridization Buffer (见溶液配方)
    
33. 洗膜液 (2x SSC + 0.1% SDS) (见溶液配方)
    

仪器设备

1. NanoDrop 2000 (Thermo)
   
2. 电泳槽
   
3. 水浴锅和干浴锅
   
4. 扫磷屏的机器为FUJIFILM的FLA-5100多功能影像分析仪，磷屏为该仪器配件
   

实验步骤